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目的 观察大鼠心力衰竭细胞中microRNA (miRNA)表达变化,利用生物信息学分析技术探索差异miRNA靶基因的功能。 方法 18只成年雄性SD大鼠,体质量200~220 g,随机数字表法随机分为两组:正常对照组(CON组)和心力衰竭组(HF组)。HF组制备阿霉素致心力衰竭模型,CON组注射等量生理盐水。提取大鼠心脏,Largendorff逆行灌注法分离心室肌细胞,提取总RNA行miRNA表达谱检测,筛选两组差异表达的miRNA,荧光定量RT- PCR 技术验证结果, Targetscan、miRanda软件预测差异表达miRNA的靶基因,并对靶基因行生物信息学分析。 结果 芯片检测结果显示,与CON组相比,HF组共有37个miRNA表达发生显著改变,其中22个miRNA上调,15个miRNA下调(均P<0.01,FDR<0.05)。荧光定量RT- PCR检测miR-133b-5p (t=14.56,P<0.1)、 miR-6216 (t=9.32,P<0.1)、let-7e-5p (t=13.92,P<0.1)表达水平,变化趋势与芯片结果一致。生物信息学分析显示,差异表达miRNA调控的靶基因显著富集于31个基因组(均P<0.01,FDR<0.05)和12条信号通路(均P<0.05,FDR<0.05),其中泛素蛋白酶体系统、MAPK信号通路、Toll样受体信号通路富集程度较高。 结论 阿霉素诱导的心力衰竭模型大鼠心肌细胞中miRNA表达谱发生显著改变,这些差异表达miRNA可能通过调控靶基因功能参与心力衰竭的病理生理过程。
朱海娟,何淑芳,金世云,许士进,张野. 慢性心力衰竭大鼠心肌细胞microRNA表达谱及生物信息学分析[J]. 中华急诊医学杂志, ,: 439-443.