目的：通过合成特异性S1PR3激动剂KRX-725，探讨S1PR3参与细菌清除的功能及其分子机制。方法：20只健康清洁级雄性C57BL/6小鼠以随机数字法分为S1PR3特异性激动剂KRX-725治疗组和对照组。采用大肠杆菌(3×106)腹腔注射诱导脓毒症模型，治疗组小鼠于模型后立即腹腔注射KRX-725（10 mg/kg），对照组给予等体积的溶剂，比较两组小鼠48 h生存率（n=12）。模型后24 h检测腹腔及血液细菌负荷（n=5），并取肺组织进行苏木精-伊红染色（HE染色）评估KRX-725治疗组及对照组的肺脏病理损伤程度（n=3）。体外采用大肠杆菌刺激腹腔巨噬细胞（细胞∶细菌=1∶10），分别加入KRX-725及其对照溶剂，采用CM-H2DCFDA探针标记细胞内活性氧，酶标仪检测检测不同时间点巨噬细胞活性氧水平。庆大霉素保护实验观察KRX-725对巨噬细胞的清除细菌能力的影响。生存率分析采用Log-rank test，组间数据比较采用独立样本t检验分析，P＜0.05为差异有统计学意义。结果：KRX-725治疗组脓毒症小鼠48 h生存率较对照组显著提高（P＜0.05）。脓毒症模型后24 h，KRX-725治疗组较对照组血液及腹腔灌洗液中的细菌负荷显著降低（血液：t=3.17,P＜0.05；腹腔灌洗液：t=4.07,P＜0.01），同时KRX-725可显著降低脓毒症模型肺组织损伤程度（肺损伤评分：KRX-725组 1.4±0.25,对照组 2.4±0.25）（t=2.89,P＜0.05）。体外实验，KRX-725治疗组较对照组可迅速上调大肠杆菌刺激后20 min及30 min细胞内活性氧的水平（20 min荧光强度：KRX-725组 522.9±38.76，对照组385.9±15.90，P＜0.05；30 min荧光强度：KRX-725组 519.7±25.02，对照组384.5±15.28，P＜0.01）。庆大霉素保护实验发现，KRX-725可显著降低细菌吞噬后3 h及6 h巨噬细胞内存活的大肠杆菌的数量（3 h：KRX-725组 286.5±98.35，对照组710.8±107.8，P＜0.05；6 h：KRX-725组72.5±6.45，对照组205.8±66.76，P＜0.01）。结论：体内应用KRX-725可改善脓毒症小鼠生存率，降低血液及腹腔细菌负荷，减轻肺脏损伤，从而改善脓毒症预后。体外KRX-725通过上调巨噬细胞活性氧的水平，提高巨噬细胞对清除细菌的能力。

张坚,侯金超,徐孟龙,方向明. S1PR3激动剂KRX-725促进细菌清除影响脓毒症小鼠预后[J]. 中华急诊医学杂志, ,: 57-62.
DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2016.01.013

基金项目：国家自然科学基金（81201495）

关键词： 脓毒症 1-磷酸鞘氨醇受体3 巨噬细胞 活性氧 细菌清除

引证文献(引用了本文的文献)

1） 陈悦. Myristoyl-glycine修饰的S1PR3特异性激动肽跨膜激活效应研究[J]. 中华急诊医学杂志,2017,26,12:1418-1421

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3） 王俊. S1PR3特异性激动剂RY-15促进细菌清除的作用研究[J]. 中华急诊医学杂志,2018,27,10:1117-1120

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