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The effect of Nrf2 overexpression in bone marrow mesenchymal stem cells damage induced by
作者：蔡晓霞,陈燕珍,周挺,赵光举,邱俏檬,洪广亮,卢阳,卢中秋
发布日期：2015-07-31
目的 观察核因子E2相关因子2转录因子(nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)基因过表达对百草枯(paraquat, PQ)诱导的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)损伤的影响。方法 BMSCs随机(随机数字法)分为6组：正常BMSCs组、BMSCs-mCherry(红色荧光蛋白)组、BMSCs-Nrf2组、BMSCs+PQ组、BMSCs-mCherry+PQ组、BMSCs-Nrf2+PQ组。正常BMSCs组、BMSCs-mCherry组、BMSCs-Nrf2组：正常培养基培养；BMSCs+PQ组、BMSCs-mCherry+PQ组、BMSCs-Nrf2+PQ组：终浓度1.0 mmol/L的PQ培养。24 h之后收集细胞及上清液，蛋白免疫印迹法(western blot)检测胞核内Nrf2蛋白量，CCK-8法检测细胞存活率，流式细胞仪检测细胞凋亡情况，化学比色法检测上清液脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量及过氧化氢酶(CAT)的活性，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液白细胞介素-6(IL-6)、IL-10及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。数据通过SPSS 20.0进行统计学分析，组间比较采用单因素方差分析。结果 BMSCs-mCherry+PQ组与BMSCs+PQ组比较，各测定数据差异无统计学意义(P＞0.05)。与BMSCs组比较，BMSCs+PQ组细胞核Nrf2蛋白表达量明显上升(P=0.008)；与BMSCs+PQ组比较，BMSCs-Nrf2+PQ组Nrf2蛋白表达量升高(P=0.031)。与BMSCs组比较，BMSCs+PQ组细胞存活率明显下降，细胞凋亡率明显升高(P=0.000)；与BMSCs+PQ组比较，BMSCs-Nrf2+PQ组细胞存活率明显升高[(53.27±2.40)％ vs. (75.20±2.92)％ ,P=0.000]，凋亡数量显著降低[(26.43±2.21)％ vs. (16.30±1.73)％,P=0.000]。与BMSCs组比较，BMSCs+PQ组MDA、IL-6、TNF-α水平明显上升，CAT、IL-10水平明显降低(P=0.000)；与BMSCs+PQ组比较，BMSCs-Nrf2+PQ组MDA含量明显降低[(43.88±0.89) nmol/L vs. (37.29±1.88) nmol/L,P=0.000]，上清液CAT活力明显升高[(22.82±0.63) U/mL vs. (38.45±1.24) U/mL,P=0.000]， IL-6蛋白含量显著降低[(75.57±11.63) pg/mL vs. (52.00±5.87) pg/mL,P=0.001]， IL-10的蛋白含量明显升高[(6.96±0.93) pg/mL vs. (15.59±1.73) pg/mL, P=0.000]， TNF-α的蛋白含量显著降低[(164.51±9.29) pg/mL vs. (124.62±2.95) pg/mL, P=0.000]。结论 Nrf2基因可明显提高BMSCs细胞核Nrf2蛋白的基础表达量，上调Nrf2-ARE通路的表达活性，抵抗PQ对BMSCs的损伤作用。
蔡晓霞,陈燕珍,周挺,赵光举,邱俏檬,洪广亮,卢阳,卢中秋. Nrf2基因过表达对百草枯诱导的骨髓间充质干细胞损伤的影响[J]. 中华急诊医学杂志, 2015,24(8): 851-856.DOI号:
基金项目：浙江省医药卫生科技计划（2012-ZD-A033）
关键词： Nrf2 百草枯 骨髓间充质干细胞 氧化应激
