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N-乙酰半胱氨酸在百草枯诱导A549细胞转分化过程中的保护作用
N-Acetyl-cysteine protects A549 cells in Paraquat-induced epithelial-mesenchymal transition
作者:宋扬,孙昊,余国琴,张晓敏,吴雨璇,王军,张劲松    发布日期:2019-06-13    

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(N-Acetyl-cysteine, NAC)在百草枯(Paraquat, PQ)诱导人非小细胞肺癌细胞(A549细胞)发生上皮间充质细胞转分化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)过程中的保护作用以及机制。 方法 利用A549细胞暴露于不同浓度的PQ溶液,构建拟肺泡上皮细胞EMT模型。分别于第0,2,4,6 d收获细胞。观察NAC干预效果时,在PQ暴露前2 d加入10 mM NAC孵育细胞。光镜下观察A549细胞的形态学改变,实时定量PCR(Real-time quantitative PCR, RT-qPCR)和Western-blotting技术检测EMT标记物E-cadherin和α-SMA的表达变化以及TGF-β1 的表达水平。 结果 30 μM PQ染毒A549细胞4 d后建立EMT模型,与对照组相比,PQ组A549细胞表现出典型的形态学改变,细胞由鹅卵石样的上皮细胞外观特征向纺锤形的间质细胞样外观特征改变。Western-blotting结果表明PQ组的A549细胞的TGF-β1、α-SMA蛋白水平表达明显高于对照组,E-cadherin蛋白水平表达低于对照组(均P<0.05)。10 mM NAC预孵育可以有效逆转PQ暴露引起的上述改变,表现为EMT指标E-cadherin升高而α-SMA下降(均P<0.05),且形态学也发现在应用NAC后,纺锤形的间质细胞样的细胞减少且细胞数量有所增加。 结论 通过细胞实验证明,PQ暴露可以引起上皮细胞发生上皮间充质细胞转分化,NAC在此过程中具有细胞保护作用。

宋扬,孙昊,余国琴,张晓敏,吴雨璇,王军,张劲松. N-乙酰半胱氨酸在百草枯诱导A549细胞转分化过程中的保护作用[J]. 中华急诊医学杂志, 2019,28(6): 712-716.
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