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组织抑制因子-1siRNA对脓毒症血清诱导内皮细胞损伤的影响
Effect of tissue inhibitor of metalloproteinases-1 siRNA on endothelial cells injury induced by septic serum
作者:易梦秋,余旻    发布日期:2018-08-08    

目的 探讨siRNA干扰组织抑制因子-1(TIMP-1)的表达对脓毒症血清诱导人脐静脉内皮细胞损伤的影响及其机制。方法 制备脓毒症患者的血清和健康志愿者的血清,体外培养人脐静脉内皮细胞株(HUVECs),随机分为空白组(正常培养)、对照组(10%健康志愿者血清干预)、脓毒症组(10%脓毒症患者血清干预)、阴性对照组(阴性siRNA转染+10%脓毒症患者血清干预)、TIMP-1 siRNA组(TIMP-1 siRNA转染+10%脓毒症患者血清干预)。四唑盐比色(MTT)法检测内皮细胞的存活率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及TIMP-1的含量;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测内皮细胞MMP-9、TIMP-1及血栓调节蛋白(TM)的表达。结果 与对照比较,脓毒症组内皮细胞存活率于12 h开始下降(P < 0.05),48 h降至最低(P < 0.01),培养上清液中MMP-9及TIMP-1含量升高(P < 0.01),MMP-9及TIMP-1蛋白表达上调(P < 0.01),TM蛋白表达下调(P < 0.01);与脓毒症组比较,TIMP-1 siRNA组内皮细胞存活率下降(P < 0.05),培养上清液中MMP-9含量升高(P < 0.05),TIMP-1含量降低(P < 0.05),MMP-9蛋白表达上调(P < 0.01),TIMP-1及TM蛋白表达下调(P < 0.01)。结论 TIMP-1在脓毒症血清诱导的内皮细胞损伤中发挥保护作用。

易梦秋,余旻. 组织抑制因子-1siRNA对脓毒症血清诱导内皮细胞损伤的影响[J]. 中华急诊医学杂志, ,: 876-880.
DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2018.08.012

基金项目:湖北省自然科学基金项目(2014CFA073)

关键词: 基质金属蛋白酶-9 组织抑制因子-1 内皮细胞 siRNA



  • 引证文献(引用了本文的文献)
  • 1) 吴娜. 血栓调节蛋白、NGAL、5-羟色胺对ICU脓毒症发病和预后的评估作用[J]. 临床和实验医学杂志,2021,20,11:1167-1170
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