 | 现在位置是： | 首 页 | >> |
 | 关键字： |
MicroRNA-132 enhances acetylcholine-mediated inhibitory effect on lipopolysaccharide induced alveolar macrophages inflammatory reaction
作者：刘芬,李勇,赵宁,李东海,江榕,曾振国,邵强,彭菲菲,王燕,钱克俭 发布日期：2015-12-11
目的 观察调控microRNA-132(miR-132)联合乙酰胆碱(ACh)对脂多糖 (LPS)诱导的大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应的作用。方法 分别采用FAM荧光标记的mimic/ inhibitor阴性对照(NC)、miR-132 mimic/ inhibitor、mimic/ inhibitor NC转染大鼠肺泡巨噬细胞NR8383，通过荧光显微镜观察转染效率，实时荧光定量PCR检测miR-132的表达。转染后细胞给予LPS(1 μg/mL)刺激或LPS+ACh(10 μmol/L)处理，采用酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6) 浓度。两组间均数比较采用独立样本t检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。结果 通过在NR8383细胞中转染mimic FAM NC确定50 nmol/L为转染mimic的最佳浓度。与mimic NC组相比，miR-132 mimic组细胞中miR-132 的表达上调了(21.54±2.14)倍(P=0.001)。LPS组中结果发现miR-132 mimic上清液中TNF-α(P=0.683)、IL-1β(P=0.770)、IL-6(P=0.872)水平较mimic NC差异均无统计学意义；LPS+ACh+mimic NC组TNF-α(P=0.008)、IL-1β(P=0.004)、IL-6(P=0.003)水平与LPS+mimic NC组相比均下降；LPS+ACh+miR-132 mimic组TNF-α(P=0.001)、IL-1β(P=0.001)、IL-6(P=0.001)水平与LPS+ACh+mimic NC组相比均下降。通过转染inhibitor FAM NC确定100 nmol/L为转染inhibitor的最佳浓度。LPS组miR-132 inhibitor上清液中TNF-α(P=0.800)、IL-1β(P=0.449)、IL-6(P=0.418)水平较inhibitor NC差异均无统计学意义。LPS+ACh组结果显示miR-132 inhibitor可逆转ACh介导的TNF-α(P=0.018)、IL-1β(P=0.022)、IL-6(P=0.032)水平的下降。结论 在体外培养环境，单独给予LPS时过表达miR-132或抑制miR-132活性不影响肺泡巨噬细胞炎症反应，但miR-132可增强ACh对LPS诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应的抑制作用。
刘芬,李勇,赵宁,李东海,江榕,曾振国,邵强,彭菲菲,王燕,钱克俭. MicroRNA-132增强乙酰胆碱对肺泡巨噬细胞炎症反应的抑制作用[J]. 中华急诊医学杂志, 2015,24(12): 1402-1406.DOI号:
基金项目：国家自然科学基金（81101410，81460292）；江西省自然科学基金（20122BAB205002）
关键词： miR-132 乙酰胆碱 脂多糖 转染 肺泡巨噬细胞 炎症反应
