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CHR inhibits TNF-α-induced vascular endothelial cell hyperpermeability by calcium signal pathway mechanism
作者：罗丽,张丹,古妮娜,魏伏,陈晓迎,姜丽萍,蔡国强,刘景仑 发布日期：2015-07-01
目的：探讨嗜铬粒蛋白A（chromogranin A，CGA）衍生多肽Chromofungin（CHR）对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导血管内皮细胞钙内流的影响。方法：以人脐静脉内皮细胞系EA.hy926细胞为研究对象，建立TNF-α刺激炎症模型，实验分为对照组、TNF-α组、10 nmol/L CHR+TNF-α组、100 nmol/L CHR+TNF-α组和1 000 nmol/L CHR+TNF-α组。Transwell小室法检测EA.hy926细胞通透性，激光共聚焦法检测EA.hy926细胞内钙离子浓度（［Ca2+］i）的变化。结果：与对照组比较，TNF-α组明显增加EA.hy926细胞通透性[（1.189±0.086)vs.(1.771±0.195)，t=4.343，P=0.01]； 10 nmol/L、100 nmol/L和1 000 nmol/L CHR抑制TNF-α诱导的EA.hy926细胞通透性增加，其中10 nmol/L和100 nmol/L CHR显著降低TNF-α诱导的EA.hy926细胞高通透性[（1.771±0.195)vs.(1.315±0.134)，t=3.403，P=0.042;(1.771±0.195）vs.（1.236±0.181），t=3.985，P=0.017]，1 000 nmol/L CHR降低TNF-α诱导的EA.hy926细胞高通透性，差异无统计学意义[（1.771±0.195)vs.(1.411±0.255)，t=2.679，P=0.126]。10 nmol/L、100 nmol/L和1 000 nmol/L CHR 作用于EA.hy926细胞时细胞内Ca2+浓度无明显变化。TNF-α诱导EA.hy926细胞外Ca2+快速内流，各时间点细胞内Ca2+荧光强度Ft40、Ft100与起始荧光值Ft30比较，差异具有统计学意义[荧光强度分别为：(41.497±3.788)vs.(56.193±3.082)，F=196.129，P=0.000；(41.497±3.788)vs.(53.457±4.536)，F=101.19，P=0.000]，10 nmol/L、100 nmol/L和1 000 nmol/L CHR能够抑制TNF-α引起的Ca2+快速内流。结论：CHR抑制TNF-α诱导的EA.hy926细胞通透性增加，这一作用可能是通过阻止TNF-α诱导的细胞外Ca2+内流来实现的。
罗丽,张丹,古妮娜,魏伏,陈晓迎,姜丽萍,蔡国强,刘景仑. Chromofungin抑制TNF-α诱导血管内皮通透性增加的钙信号机制[J]. 中华急诊医学杂志, ,: 744-750.DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2015.07.011
基金项目：国家自然科学基金
关键词： 血管内皮细胞 EA.hy926细胞 钙离子 嗜铬粒蛋白A Chromofungin 肿瘤坏死因子-α
