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LPS-induced HIF-1α and COX-2 expression in intestinal epithelial cells and the intervention efficacy of emodin
作者：祁蕾,傅强,崔乃强,张国倩
发布日期：2014-04-01
目的 观察脂多糖（LPS）处理肠上皮细胞对缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及下游炎症相关靶基因环氧化酶-2（COX-2）表达的影响，探讨大黄素干预的可能作用靶点。方法建立LPS处理人肠上皮细胞的体外实验模型。①用Western blot检测LPS不同剂量和不同时间处理组的HIF-1α和COX-2蛋白表达的变化趋势；检测LPS和不同剂量大黄素共同干预组的HIF-1α、COX-2、Phospho-IκB-α和Phospho-NF-κB p65蛋白表达的变化趋势。②用PCR检测LPS处理组与LPS和大黄素共同干预组HIF-1α的mRNA水平。③用MTT法检测大黄素对肠上皮细胞增殖情况的影响。数据采用单因素方差分析，以P＜0.05为差异具有统计学意义。结果①LPS可引起HIF-1α表达升高，且有时间和剂量效应关系。随LPS质量浓度的增加，HIF-1α的表达量先增高后降低，在质量浓度为10-3mg/mL时HIF-1α表达量最高（P＜0.05）；HIF-1α表达首先在0.5 h达峰值，而后到4 h下降至最低，最后又增高（P＜0.05）。COX-2蛋白表达变化趋势与HIF-1α基本一致（P＜0.05）。大黄素可抑制LPS诱导的HIF-1α、COX-2、Phospho-IκB-α和Phospho-NF-κB p65的表达，并有明显量效关系（P＜0.05）。②PCR检测LPS刺激后HIF-1α的mRNA水平增高，而大黄素抑制其增高。③MTT 法检测不同浓度的大黄素（0 μmol/L、20 μmol/L、40 μmol/L、60 μmol/L、80 μmol/L）对细胞增殖无明显影响（0.95±0.02、0.89±0.03、0.88±0.04、0.91±0.03、0.83±0.03，P＞0.05）。虽然大黄素在此浓度范围产生了生物学效应，但对肠细胞无药物毒性。结论LPS激活肠上皮细胞HIF-1α/COX-2信号通路，且具有时间和剂量依赖性。大黄素可能通过阻断LPS/HIF-1α/COX-2的缺氧通路和LPS/IκB-α/NF-κB/COX-2的炎症通路而对肠上皮细胞起到保护作用。
祁蕾,傅强,崔乃强,张国倩. 脂多糖诱导肠上皮细胞HIF-1α和COX-2表达及大黄素干预作用的研究[J]. 中华急诊医学杂志, ,: 371-376.DOI号:
基金项目：国家重点基础研究发展计划资助项目（2009CB522703）
关键词： 脂多糖 缺氧诱导因子-1α 肠上皮细胞 大黄素 环氧化酶-2
