目的 探讨PTEN诱导酶1（PTEN-induced putative kinase 1, Pink1）/帕金蛋白（parkin）通路在劳力型热射病（exertional heat stroke, EHS）大鼠急性肺损伤中的作用。方法 将60只SD大鼠随机分为4组，正常组（CON组）、正常Parkin过表达组（CON+Parkin组）、劳力型热射病组（EHS组）和劳力型热射病Parkin过表达组（EHS+Parkin组），每组大鼠15只。正常Parkin过表达组和EHS Parkin过表达组大鼠经尾静脉注射携带有Parkin基因的腺相关病毒0.15 μL。20 d后，建立EHS大鼠模型，绘制生存曲线。检测肺系数和肺毛细血管通透性；HE染色观察肺组织病理变化；ELISA方法检测肺组织中白介素（interleukin, IL）-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α（tumour necrosis factor-α, TNF-α）和活性氧簇（reactive oxygen species, ROS）的含量；免疫组织化学观察肺组织凋亡；Western blot方法测定大鼠肺组织中Pink1、Parkin、泛素结合蛋白P62（Ubiquitin-binding protein p62）和微管相关蛋白1轻链3（microtubule-associated protein 1 light chain 3, LC3）的表达，并计算LC3-II/LC3-I比值。免疫荧光检测Pink1和Parkin共定位。单因素多水平组比较采用单因素方差分析，采用SNK-q法进一步进行组间两两比较。结果 与正常组相比，EHS组大鼠生存率降低（P<0.001），肺系数和肺血管通透性均升高[（4.39±0.42）、（33.38±8.29）μg/g，P<0.05）]，肺组织发生渗出和实变，炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α和ROS水平均显著升高[（34.31±5.34）pg/mL、（34.03±4.78）pg/mL、（91.64±8.16）pg/mL、（259.01±89.17）U/mg，P<0.05]，细胞凋亡增加。Western及免疫荧光结果显示，劳力型热射病大鼠Pink1、Parkin表达减少，Pink1和Parkin结合减弱，LC3-II/LC3-I比值降低，P62表达增加。与EHS组相比，EHS Parkin过表达组的大鼠生存率明显升高（P<0.05），肺系数和肺血管通透性均降低[（3.83±0.62）、（22.49±7.90）μg/g，P<0.05]，渗出和实变等病理改变明显减轻，上述炎症因子和ROS水平均显著降低[（14.09±3.24）pg/mL、（26.94±2.11）pg/mL、（63.35±11.62）pg/mL、（161.13±26.31）U/mg，P<0.05]；肺组织凋亡减轻。肺组织中Parkin表达和LC3-II/LC3-I比值均升高(P<0.05)，Pink1和Parkin的结合增强，P62表达减低(P<0.05)，而Pink1表达差异无统计学意义（q=0.75）。正常组和正常Parkin过表达组之间差异无统计学意义（q=0.95）。结论 激活Pink1/Parkin通路，增强线粒体自噬可减轻劳力型热射病大鼠急性肺损伤。

孙正中,江利亚,孟冉,马运亚,顾焱,张玉想,王佳兴. 激活Pink1/Parkin通路减轻劳力型热射病大鼠急性肺损伤[J]. 中华急诊医学杂志, 2024,33(7): 983-990.
DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2024.07.017

基金项目：军事医学创新工程项目(18CXZ023)；解放军总医院第八医学中心重点课题（2016ZD-008）
伦理审批号：解放军总医院第八医学中心动物伦理委员会（309202011301010）

关键词： 劳力型热射病 急性肺损伤 线粒体自噬 Parkin 大鼠