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Role of SIRT1 in lipopolysacchride - induced mitochondrial injury in INS-1 cells
作者：莫兴兴,王晓,葛勤敏,边帆 发布日期：2018-11-06
目的 探讨沉默信息调节因子（silent mating type information regulation 2 homolog1，SIRT1）在脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导胰岛素瘤细胞-1（insulinoma cell lines-1, INS-1）细胞线粒体损伤中的作用。方法 将对数生长期的INS-1 细胞分为5组：正常对照组、1 mg/L LPS组（LPS 干预细胞24 h）、白藜芦醇（resveratrol，RSV）+LPS组（10 μmol/L RSV 预处理1 h 后，加入1 mg/L LPS 干预24 h）、EX527+LPS组（20 μmol/L EX527 预处理1 h 后，加入1 mg/L LPS干预24 h）、EX527+RSV+LPS组（20 μmol/L EX527 预处理1 h 后，加入10 μmol/L 的RSV 和1mg/L LPS 干预24 h）。检测细胞活力和ATP 生成；提取INS-1 细胞总蛋白、胞质蛋白和线粒体蛋白，Western-blot 法检测SIRT1、TLR4、乙酰化FoxO1、细胞色素C（cytochrome C，CytC）、线粒体融合蛋白1（mitofusion1，Mfn1）、线粒体融合蛋白2（mitofusion2，Mfn2)、线粒体分离蛋白1（fission1，Fis1）蛋白的表达； Real-time PCR 方法检测SIRT1、FoxO1、Mfn1、Mfn2、Fis1 基因水平的变化。多组间比较采用单因素方差分析，用LSD-t 法进行组间两两比较。结果 1 mg/L LPS 作用于INS-1细胞24 h后，细胞活力降低（n=4，F=13.98，P＜0.01），ATP 生成减少（n=4，F=27.92，P＜0.05），RSV 预处理后促进ATP 生成（P＜0.01），但不能逆转EX527 预处理后ATP 生成的降低（P＞0.05）。RSV 可以促进SIRT1、Mfn1、Mfn2 蛋白表达和基因上调，降低TLR4 和Fis1 蛋白表达，下调其基因水平，减少CytC 在细胞质中的释放（P＜0.01），而各组间FoxO1 蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 白藜芦醇可能通过改变SIRT1的活性，调控FoxO1 的乙酰化，部分参与调节LPS 诱导的INS-1 细胞线粒体的损伤。
莫兴兴,王晓,葛勤敏,边帆. 沉默信息调节因子1在脂多糖诱导胰岛素瘤细胞-1线粒体损伤中的作用[J]. 中华急诊医学杂志, ,: 1224-1231.DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2018.11.009
基金项目：上海市自然科学基金（14ZR1427000）,上海市卫生和计划生育委员会科研课题（201740081）
关键词： 沉默信息调节因子 乙酰化叉头蛋白1 桥样受体4 线粒体融合与分离
