目的 探讨晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation endproducts, RAGE)在高迁移率族蛋白B1（high mobility group box-1 protein, HMGB1）介导CD4+T细胞Th1/Th2功能性分化中的作用。方法 体外分离、培养小鼠脾脏CD4+T 淋巴细胞，将细胞浓度调整为2×106/L，接种至96 孔培养板，0.2 mL/ 孔，预先加入终浓度为3 μg/L的刀豆素A（ConA）刺激12 h；依据HMGB1刺激剂量随机分成4组：对照组、10 ng/mL组、100 ng/mL组和1 000 ng/mL，分别在HMGB1刺激12 h、24 h和48 h 时间点，利用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbentassay，ELISA）法检测白介素-4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）表达；根据实验结果，在后期实验中选择100 ng/mL HMGB1刺激时间为24 h；将ConA刺激后的细胞细胞随机分成4组：对照组、A组(HMGB1刺激)、B组（HMGB1+PBS刺激）、C组（HMGB1+RAGE抗体刺激）。A、B、C组分别加入PBS 稀释的终浓度为100 ng/L HMGB1工作液，对照组加入等容积的PBS液；其中B、C组在HMGB1刺激之前加入PBS 液或PBS 液1:200 稀释的终浓度为5 μg/L RAGE中和抗体孵育2 h；分别采用Western-blot和荧光定量PCR 法测定RAGE、CATA-3的表达；ELISA 法检测白介素-4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）表达，多组之间的数据比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t 检验，以P<0.05 为差异有统计学意义。结果与对照组（6.07±0.25）比较，100ng/mL HMGB1刺激24 h（4.43±0.17）、48 h（3.67±0.09），IFN-γ/IL-4 显著下降（P<0.05）；而与对照组比较（6.34±0.42），10 ng/mL HMGB1刺激24 h（7.65±0.19），IFN-γ/IL-4比值显著增加（P<0.05），而100 ng/mL（5.10±0.19）和1 000 ng/mL HMGB1（3.31±0.12）刺激24 h IFN-γ/IL-4 显著下降（P<0.05）；与对照组比较，A组RAGE 蛋白和mRNA 表达显著升高（P<0.05）；A、B组IFN-γ/IL-4比值（A组 5.75±0.27；B组 5.66±0.31）较对照组（7.37±0.36）明显降低（P<0.05），GATA3 mRNA 显著升高（P<0.05）；而C组IFN-γ/IL-4比值（6.19±0.14）较A组升高（P<0.05），GATA3 mRNA 下降（P<0.05），A组与B组比较差异无统计学意义（P>0.05）；与A组比较，B组RAGE的表达差异无统计学意义（P>0.05），C组明显降低（P<0.05），而C组较对照组RAGE的表达仍有明显增加（P<0.05）。结论 HMGB1体外介导的CD4+T 淋巴细胞向Th2 功能性分化至少部分是通过过度活化RAGE/GATA3途径来实现的。

汤鲁明,金晓晴,谢奇朋,赵剡. RAGE在高迁移率族蛋白B1调控CD4+T细胞Th1/Th2功能性分化中的作用[J]. 中华急诊医学杂志, ,: 295-300.
DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2018.03.013

基金项目：国家自然科学基金项目（LY15H150008）

关键词： 高迁移率族蛋白B1 晚期糖基化终产物受体 CD4+T细胞 辅助性T细胞-1/辅助性T细胞-2

引证文献(引用了本文的文献)

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