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MicroRNA-146a调控肺泡巨噬细胞炎症反应的机制
The regulationary mechenisim of miRNA-146a on inflammatory response in alvcolar macrophages induced by LPS
作者:张建国,陈晓娟,丁成志,邵强,曾振国,刘芬,钱克俭    发布日期:2015-04-07    

[目的] 观察 microRNA-146a(miR-146a)对脂多糖(LPS)诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应的影响,并探讨其机制。方法 将体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞接种于6孔板,分别转染50nmol/L miR-146a拟似物(minic)和阴性对照,随后用1μg/ ml终浓度的LPS 刺激6 h,采用免疫荧光法观察核转录因子κB(nuclear factor-KappaB,NF-κB)p65 的核移位,ELISA检测培养上清液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)蛋白的表达,实时定量逆转录PCR(real time-quantitative PCR,RT-qPCR)检测细胞中白介素-1受体相关激酶1(interleukin-1 receptor-associated kinase,IRAK-1)mRNA、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TNF receptor-associated factor 6,TRAF-6)mRNA和TNF-α mRNA的表达,蛋白质免疫印迹实验(Western bloting)检测细胞内 IRAK-1、TRAF-6、NF-κB p65蛋白的表达。应用SPSS17.0统计软件分析数据,数据以均数±标准差表示,两样本比较采用独立样本t检验。P<0.05为差异有统计学意义。结果 与对照组比较,倒置荧光显微镜下观察到转染组 NF-κB p65 胞浆中表达增多,胞核中减少,Western bloting 检测到NF-κB p65蛋白在胞浆中表达增加为(1.74±0.11)、胞核中表达下降为(0.56±0.12)(P<0.05);细胞 TNF-α mRNA 表达下降为(0.47±0.06)(P<0.05),上清液中 TNF-α 蛋白表达下降(616.60±42.28pg/ml比211.50±30.39pg/ml)(P<0.01);IRAK-1 mRNA 和 TRAF-6 mRNA 表达量无明显变化(P>0.05),而 IRAK-1 和 TRAF-6 蛋白表达水平分别下降为(0.73±0.05)(P<0.05)和(0.64±0.09)(P<0.05)。结论 miR-146a能够调控肺泡巨噬细胞炎症反应,其机制可能是转录后水平作用于 IRAK-1和TRAF-6 蛋白,阻断NF-κB的活化,发挥抗炎作用。

张建国,陈晓娟,丁成志,邵强,曾振国,刘芬,钱克俭. MicroRNA-146a调控肺泡巨噬细胞炎症反应的机制[J]. 中华急诊医学杂志, 2015,24(4): 413-415.
DOI号:

基金项目:国家自然科学基金项目(81060152);国家自然科学基金青年基金项目(81101410)

关键词: 微小RNA-146a 白介素-1受体相关激酶1 肿瘤坏死因子受体相关因子6 核转录因子κB 肿瘤坏死因子-α



  • 引证文献(引用了本文的文献)
  • 1) 刘芬. MicroRNA-132增强乙酰胆碱对肺泡巨噬细胞炎症反应的抑制作用[J]. 中华急诊医学杂志,2015,24,12:1402-1406
  • 2) 刘芬. MicroRNA-132通过调控胆碱能通路减轻肺泡巨噬细胞炎症反应[J]. 中国病理生理杂志,2016,32,2:261-266
  • 3) 狄开荣. 瑞舒伐他汀通过miR-146a抑制IRAK1/TRAF6/NF-κB信号通路减轻大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤[J]. 中华急诊医学杂志,2022,31,6:794-797
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