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目的:观察在急性百草枯中毒大鼠经过乌司他丁(UTI)治疗后,肺细胞中自噬和凋亡的变化。方法:将150只Wistar大鼠按计算机生成的随机排列表法分为3组,每组50只。对照组(con组)则一次性给予1 mL生理盐水灌胃,之后每日2次腹腔注射1 mL生理盐水;采用一次性灌胃40 mg/kg PQ溶液1 mL制备PQ染毒模型,之后每日1次腹腔注射1 mL生理盐水;PQ染毒UTI治疗组大鼠给予UTI(12万U/kg)腹腔注射(2次/d);染毒后第7天留取肺脏组织,行肺部HE染色观察肺组织形态,免疫组织化学法检测肺组织LC3和Bcl-2的表达,Western blot检测肺组织中LC3、Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:HE染色结果显示,Con组大鼠肺组织形态正常;PQ染毒组肺组织结构部分破坏,部分肺泡壁塌陷,部分肺泡腔扩大,局部炎细胞浸润。可见肺泡隔显著增厚,明显的局部出血;UTI治疗组肺组织结构破坏较轻。Western blot结果显示,与Con组相比,PQ组LC3 A/B蛋白含量表达增高且差异具有统计学意义〔LC3表达量(A值):0.22±0.05 vs.0.14±0.03,F=22.48,P<0.01〕;与PQ组相比,PU组中LC3 A/B蛋白含量表达增高差异有统计学意义〔LC3表达量(A值):0.36±0.08 vs.0.22±0.05,F=22.78,P<0.01〕。与Con组相比,PQ组Bcl-2/Bax蛋白含量表达明显降低差异有统计学意义〔Bcl-2/Bax表达量(A值):0.11±0.04 vs.0.83±0.09,F=154.43, P<0.01〕;与PQ组相比,PU组中Bcl-2/Bax蛋白含量表达增高差异有统计学意义〔Bcl-2/Bax表达量(A值):0.63±0.08 vs.0.11±0.04,F=154.43,P<0.01〕。免疫组化结果显示:与Con组相比,PQ组LC3、Bcl-2蛋白含量表达降低有统计学意义(LC3A值:78.34±10.71 vs.117.58±15.26,F=31.63,P<0.01)(Bcl-2A值:62.54±9.74 vs.130.52±9.86,F=118.44,P<0.01);与PQ组相比,PU组LC3、Bcl-2蛋白表达量增高差异有统计学意义(LC3A值:162.58±25.76 vs. 78.34±10.71,F=31.63,P<0.01)(Bcl-2A值:145.56±10.26 vs. 62.54±9.74, F=118.44, P<0.01)。结论:急性PQ中毒大鼠肺组织发生内质网应激-自噬。UTI治疗急性PQ中毒时可通过调节自噬,增加Bcl-2的表达,提高Bcl-2/Bax比例来保护肺组织。
李海峰,邢宝鹏,权玉兰,孙明莉. 乌司他丁对急性百草枯中毒大鼠的肺细胞自噬和凋亡的影响[J]. 中华急诊医学杂志, 2015,24(2): 169-174.