目的 观察脂多糖 (lipopolysaccharide, LPS) 刺激大鼠肺泡巨噬细胞NR8383后乙酰胆碱酯酶 (acetylcholinesterase, AChE) 的表达变化，为研究胆碱能抗炎通路的调控提供新的实验依据。方法将体外去致热源培养的NR8383细胞分为对照组及LPS (1 μg/mL) 刺激组，于刺激后3、6、12、24 h各时间点分别离心收集上清液及细胞沉淀，采用酶联免疫吸附法 (enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) 测定上清液中肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α) 的变化，实时定量PCR检测细胞中AChE mRNA的表达改变，蛋白质免疫印迹法 (Western blot) 检测细胞中AChE蛋白的表达变化，乙酰胆碱酯酶T-CHE测试盒检测上清液中AChE活性的变化。组间多重比较采用单因素方差分析，进一步采用LSD-t检验进行两两比较，P<0.05为差异具有统计学意义。结果与对照组相比，TNF-α的含量在LPS刺激NR8383细胞后3 h开始显著上升 (P<0.05)，12 h达高峰，24 h下降但仍明显高于对照组水平 (P<0.05)。与对照组相比，AChE mRNA于刺激后3 h开始上升，升高(3.19 ± 0.44)倍(P<0.05)，6 h后达高水平并维持于此水平，6、12、24 h分别上调［(5.65 ± 0.63)、(5.40 ± 0.71)、(5.35 ± 0.77)［倍(与对照组相比，均P<0.05)；AChE蛋白的表达及上清液中AChE的活性在LPS刺激后12 h与各自对照组相比均上升［AChE蛋白：(1.37 ± 0.01) vs.(1.05 ± 0.02)，P<0.05；AChE活性：(6.14 ± 1.13) U/mL vs. (2.64 ± 0.85) U/mL，P<0.05］，随后呈下降趋势，于LPS作用24 h时均低于各自对照组［AChE蛋白：0.65 ± 0.05，P<0.05，AChE活性：(0.56 ± 0.19 )U/mL，P<0.05］。结论LPS刺激大鼠肺泡巨噬细胞后，AChE的表达增加，提示其可能参与肺泡巨噬细胞炎症反应的调控；LPS刺激后24 h，AChE mRNA仍处于高表达水平，AChE蛋白及活性却下降，提示在肺泡巨噬细胞炎症反应中可能存在AChE转录后水平的调控。

刘芬,江榕,李勇,曾振国,赵宁,黄彩雪,夏亮,钱克俭. 脂多糖刺激大鼠肺泡巨噬细胞后乙酰胆碱酯酶的表达变化[J]. 中华急诊医学杂志, 2014,23(8): 871-875.
DOI号:

基金项目：国家自然科学基金（81101410）；国家自然科学基金（81160233）；江西省自然科学基金（20122BAB205002）

关键词： 乙酰胆碱酯酶 脂多糖 肺泡巨噬细胞 炎症反应

引证文献(引用了本文的文献)

1） 简娟. 胆碱酯酶、乳酸对脓毒症患者病情严重程度及预后的评估价值[J]. 中华危重症医学杂志（电子版）,2020,13,5:339-344

2） 彭红艳. 胆碱酯酶对重症腺病毒肺炎患儿病情评估的价值[J]. 临床儿科杂志,2021,39,10:740-744