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外源性硫化氢对大鼠海马神经元氧糖缺失/恢复损伤的作用
The effects of exogenous hydrogen sulfide on ingury of rat hippocampal neurons induced by oxygen-glucose deprivation and recovery
作者:刘蓓蓓,潘昊,陈娣,谢学猛,张锦程,杨光田    发布日期:2014-06-30    

目的:研究外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对大鼠海马神经元氧糖缺失/恢复(oxygen-glucose deprivation and recovery, OGD/R)损伤的作用,并探讨其作用机制。方法:孕16~18 d胎鼠海马神经元原代培养,培养7 d后NSE免疫组化法作神经元鉴定,培养第8天时氧糖缺失1 h恢复24 h造成缺氧/复氧损伤,缺氧同时给予硫氢化钠(sodium hydrosulphide, NaHS)干预。将大鼠海马神经元随机(随机数字法)分为3组:正常培养组(Ⅰ组)、OGD/R组(Ⅱ组)、OGD/R+ NaHS组(Ⅲ组),Ⅲ组又根据NaHS浓度分为Ⅲ1-5亚组;NaHS浓度分别为25、50、100、200、400 μmol/L。MTT法测定各组细胞活力,比色法检测各组培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,流式法检测各组细胞凋亡,RT-PCR法检测各组细胞HIF-1α mRNA表达。结果:与正常培养组比较,模型组细胞活力明显降低,培养液中LDH漏出增多,凋亡加重,HIF-1α mRNA表达增高(P<0.01);与模型组比较,Ⅲ1组细胞活力、培养液中LDH漏出、凋亡、HIF-1α mRNA表达的差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,Ⅲ2-4组细胞活力明显增高,培养液中LDH漏出减轻,凋亡减轻,HIF-1α mRNA表达增高(P<0.01);与模型组比较,Ⅲ5组细胞活力明显降低,培养液中LDH漏出增多,凋亡加重,HIF-1α mRNA表达降低(P<0.01)。结论:低浓度H2S(25 μmol/L)对海马神经元OGD/R损伤无明显影响;中浓度H2S(50~200 μmol/L)可以减轻海马神经元OGD/R损伤,增加细胞活力,减轻细胞凋亡;但高浓度H2S(400μmol/L)则可加重其损伤;海马神经元OGD/R损伤后HIF-1α mRNA表达增强,适当浓度H2S(50~200 μmol/L)可能通过上调HIF-lα的表达发挥保护作用。

刘蓓蓓,潘昊,陈娣,谢学猛,张锦程,杨光田. 外源性硫化氢对大鼠海马神经元氧糖缺失/恢复损伤的作用[J]. 中华急诊医学杂志, ,: 770-775.
DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2014.07.012

基金项目:国家自然科学基金(81071526)

关键词: 硫化氢 氧糖缺失/恢复 海马神经元 凋亡 缺氧诱导因子-1α



  • 引证文献(引用了本文的文献)
  • 1) 刘检. 改良的胎鼠海马神经元原代培养及模拟糖尿病并发抑郁环境对其的损伤作用[J]. 神经解剖学杂志,2016,32,4:459-465
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