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目的:利用体外实验研究线粒体DNA在百草枯致病机理中的作用。方法:首先用百草枯处理A549细胞,应用CCK-8法检测细胞生存率,然后利用绝对定量PCR的方法检测培养上清液中线粒体DNA的含量,及激光共聚焦成像法检测线粒体膜电位来验证百草枯对线粒体的损伤作用。接着通过Transwell趋化实验检测线粒体DNA对人外周血单个核细胞(PBMC)及中性粒细胞(PMN)的趋化活性,并用流式细胞术确定趋化细胞的亚型。同时应用xCELLigence系统和体外血管通透性试剂盒检测了线粒体DNA对血管通透性的影响。最后验证线粒体DNA在细胞增殖方面的作用。结果:百草枯致A549细胞损伤的半数致死浓度为600µmol/l,且549细胞的生存率及对线粒体的损伤存在浓度和时间依赖关系(P<0.05)。百草枯致细胞损伤释放出的线粒体DNA可以非特异的趋化单核细胞,但在血管通透性方面没有影响。并且线粒体DNA不能直接刺激人成纤维细胞的增殖,但可以引起主要的促纤维化因子TGF-β1的增加,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:百草枯损伤细胞释放的线粒体DNA在百草枯所致炎症及增殖反应中起着重要的作用。
陈丽,陈怡. 线粒体DNA在百草枯中毒机制中的体外研究[J]. 中华急诊医学杂志, 2013,22(12): 1360-1364.