目的 研究Toll样受体4(TLR4)基因小干扰RNA(siRNA)对体外缺氧复氧条件下诱导BV-2细胞分泌TNF-α的抑制作用.方法 小鼠小胶质细胞株BV-2置于六扎培养板培养，随机分为N组(正常培养组)、H组(缺氧复氧组)、T组(缺氧复氧+TLR4-siRNA转染组，转染质粒pEGFP-H1/TLR4-siRNA)、C组(缺氧复氧+对照siRNA转染组，转染含对照序列的质粒pEGFP-H1/对照-siR-NA)和B组(缺氧复氧+空白质粒转染组，转染pEGFP-H1空质粒)共5组.其中H组、T组、C组和B组细胞缺氧培养3 h后复氧培养24 h，运用脂质体转染技术介导质粒转染，流式细胞术检测转染后BV-2细胞EGFP的表达率，RT-PCR方法检测各组BV-2细胞TLR4 mRNA和NF-кB p65 mRNA的表达水平，Western blot方法检测各组BV-2细胞TLR4蛋白表达变化，ELISA方法检测各组上清液中TNF-α含量.采用方差分析进行统计分析.结果 转染后BV-2细胞EGFP的表达率为(67.58±7.16)%；经缺氧复氧处理后，H组、T组、C组和B绀的TLR4 mRNA、NF-кB p65 mRNA、TLR4蛋白水平较N组均明显上调(P＜0.01)，各组卜清液TNF-α含量较N组也明显升高(P＜0.01)；而T组TLP4 mRNA、NF-кB p65 mRNA、TLR4蛋白表达量和上清液TNF-α含量较H组、C组和B组均明显下凋(P＜0.01)；C组和B组分别与H组相比，各项检测指标表达均无明显变化(P＞0.05).结论 针对TLR4 mRNA的小干扰RNA可以有效的抑制缺氧复氧诱导的BV-2细胞的炎症反应。

孙鹏,韩继媛,张清,张景辉,田元. TLR4基因小干扰RNA对缺氧复氧诱导BV-2细胞炎症因子分泌的影响[J]. 中华急诊医学杂志, 2009,18(3): 270-273.
DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2009.03.013


关键词：

引证文献(引用了本文的文献)

1） 孙鹏,张清,韩继媛,田元,张景辉. 体外模拟脑缺血再灌注条件下BV-2细胞TLR4信号途径对TLR2表达的影响[J]. 中国科学C辑,2009,39,11:

2） Sun P, Zhang Q, Han JY, Tian Y, Zhang JH. TLR4 signaling induced TLR2 expression in the process of mimic cerebral ischemia/reperfusion in vitro[J]. SCIENCE CHINA-LIFE SCIENCES,2010,53,2:223-228

3） 孙鹏,李倩,张清,徐丽,韩继媛. 脑缺血-再灌注损伤后S100A8的表达及意义[J]. 中华急诊医学杂志,2013,22,8:855-858

4） 杨春澜. 大黄素通过TLR4/NF-κB信号通路减轻缺糖/缺氧对小胶质细胞的损伤[J]. 中国病理生理杂志,2019,35,12:2285-2289