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高氧对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞Notch受体的影响
Effect of hyperoxia on Notch receptor in alveolar epithelial type Ⅱ cells of preterm rats
作者:汪鸿,常立文,卢红艳,李文斌,蔡成,黄光焰,陈燕    发布日期:2008-11-10    

目的: 检测Notch 1在肺泡Ⅱ型上皮细胞(ACEⅡ)与肺成纤维细胞共培养的高氧损伤模型中表达的变化,初步探讨Notch信号在高氧肺损伤中的作用,为临床防治新生儿急、慢性肺损伤提供理论的依据。

方法: Spragne Dawkey雌鼠12只,体质量200~220 g,雄鼠3只,220~250 g,由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。将共培养的AEC Ⅱ随机分为高氧组和对照组。高氧组按3L/nlin通入950 ml/L O2和250 ml/L CO2,10 min后,立即用封口胶密封培养板,置于37℃、50 ml/L CO2培养箱。于给氧后24、48、72、96 h,收获各组细胞,测氧仪检测培养瓶中的O2体积分数,将低于900mi/L O2的标本弃去。免疫组织化学法鉴定细胞,台盼蓝拒染实验计算细胞纯度,确认共培养造模成功。每24 h更换培养基并给氧。每一时间点同时设对照组,置于37℃、50 ml/L CO2培养箱中培养。NTT法检测AECⅡ增殖活力,绘制生长曲线;免疫组织化学法定位Notch1蛋白;荧光定量PCR检测noteh1 mRNA;流式细胞术双标记法检测AEC Ⅱ、AEC I细胞百分率。

结果: 免疫组织化学法显示高氧组Notch1活化人核受抑;高氧组各时间点Notch1 mRNA分别下降为对照组的0.43、0.29、0.11、0.03倍(置信限95%),通氧后AECⅡ百分率显著降低[24 h高氧组vs。对照组:(68.92±6.88)%vs。(90.35±4.01)%,P=0.006;48 h高氧组vs。对照组:(38.03±3.27)%、vs。(61.47±4.81)%,P=0.000;72 h高氧组vs。对照组:(20.13±4.45)%vs。(52.05±3.35)%,P=0.000;96 h高氧组vs。对照组:(8.17±1.99)%vs。(52.59±2.93)%,P:0.000]。AEC I百分率除96 h外均增高[24 h高氧组vs。对照组:(0.1l±0.03)%vs。(0.01±0.01)%,P=0.006;48 h高氧组vs。对照组:(49.73±3.45)%vs。(16.13±2.13)%,P=0.000;72 h高氧组vs。对照组:(52.43±3.14)%vs。(5.98±0.95)%,P=0.000;96 h高氧组vs。对照组:(19.85±3.26)%vs。(29.03±3.16)%,P=0.0007]。

结论: 高氧可抑制AECⅡNotch1受体的活化,引起AECⅡ增殖减弱,转分化异常。研究如何调控Notch信号通路将为修复肺泡上皮,恢复其正常生理功能打开新思路。

汪鸿,常立文,卢红艳,李文斌,蔡成,黄光焰,陈燕. 高氧对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞Notch受体的影响[J]. 中华急诊医学杂志, 2008,17(11): 1158-1162.
DOI号:10.3760/j.issn.1671-0282.2008.11.009

基金项目:国家自然科学基金(项目编号:30471824)

关键词: 高氧 肺泡Ⅱ型上皮细胞 共培养



  • 引证文献(引用了本文的文献)
  • 1) 高洁. Notch信号通路在急性肺损伤中的作用[J]. 临床与实验病理学杂志,2014,30,05:
  • 2) 万峰云. Notch1/Hes1信号调控CCAAT/增强子结合蛋白α表达对高氧损伤肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖与分化的影响[J]. 中国组织工程研究,2018,22,32:5209-5214
  • 3) 方恩容,杨凯,何杰,邱静,黄娜. 姜黄素对高氧诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的保护作用及机制[J]. 成都医学院学报,2019,14,3:303-308
  • 4) 万峰云,卢红艳,万雪晴,等. Notch1/Hes1信号调控C/EBPα表达对AECII细胞增殖与分化的影响[J]. 中国病理生理杂志,2019,35,3:495-499
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