目的 观察表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate，EGCG)对脓毒症肠道损伤的作用，并探究对内质网应激( endoplasmic reticulum stress，ERS) 性凋亡的途径是否存在影响。方法 选取60只雄性SD大鼠，根据随机数字表法将其分为5组 ：假手术组（Sham组）、盲肠结扎穿孔术致脓毒症组（CLP组）、脓毒症+EGCG低剂量组（EL组，术后腹腔注射EGCG 25mg/kg）、脓毒症+EGCG中剂量组（EM组，术后腹腔注射EGCG 50mg/kg）、脓毒症+EGCG高剂量组（EH组，术后腹腔注射EGCG 75mg/kg）,每组均为12只。造模24h后处死各组大鼠并收集血标本和肠道组织标本。血清中白细胞介素（IL-1β、IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）采用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行检测；苏木精伊红（HE）染色后,光镜下观察回肠病理学改变，根据Chiu’s评分进行评价；肠道组织中紧密连接蛋白-1(Claudin-1)、ERS性凋亡相关蛋白磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12(Caspase-12)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的蛋白表达采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测；肠道组织中Claudin-1、ERS性凋亡相关蛋白p-PERK、CHOP、Caspase-12的阳性面积采用免疫组化法检测。结果 对比Sham组，CLP组大鼠术后24h HE 染色结果显示绒毛结构破坏且排列紊乱，腺体结构不完整，可见大量炎性细胞浸润，黏膜、黏膜下间质水肿，Chiu’s评分明显升高；血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高；回肠黏膜组织中Claudin-1表达减少，ERS性凋亡相关蛋白p-PERK、CHOP、Caspase-12表达量均显著增加。与CLP组相比，给予低、中、高剂量EGCG干预后大鼠肠道损伤均有所缓解，具体表现为：Chiu’s评分及血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平显著降低〔Chiu’s评分（分）：4.14±0.38、3.22±0.44、2.5±0.71比4.83±0.41，IL-1β（ng/L）：134.5±6.07、96.64±9.94、64.09±5.17比 148.71±10.1，IL-6（ng/L）：38.29±3.60、 35.88±4.52 比 59.81±4.66，TNF-α（ng/L）：134.52±8.53、101.1±12.77、63.73±7.69比165.22±7.37，均P＜0.05〕，回肠组织中 Claudin-1蛋白表达明显升高〔（Claudin-1/β-actin：0.3±0.04、0.54±0.11、0.81±0.04比0.09±0.01 均P＜0.05）〕，回肠组织中ERS性凋亡相关蛋白的表达明显下降〔（p-PERK/PERK：3.87±0.18、3.23±0.27、2.44±0.16比4.66±0.3，CHOP/β-actin：1.08±0.07、0.75±0.04、0.38±0.04比1.24±0.05，Caspase-12/β-actin：1.07±0.09、0.79±0.1、0.58±0.07比1.29±0.06，均P＜0.05）〕，回肠组织 Claudin-1阳性表达量升高〔 Claudin-1阳性面积：（5.86±0.5）%、（14.61±0.64）% 、（20.69±0.45）%比（1.37±0.16）%，均P＜0.05〕，ERS性凋亡相关蛋白p-PERK、CHOP、Caspase-12阳性表达有所降低〔（p-PERK阳性面积：（7.79±1.61）%、（4.76±0.56）%、（1.92±0.79）%比（11.93±3.17）%，CHOP阳性面积：（17.37±3.25）%、（11.64±1.51）% 、（5.75±0.97）%比（23.54±6.47）%，Caspase-12阳性面积：（16.68±1.14）%、（10.75±1.08）%、（5.17±0.39）%比（23.14±1.5）%，均P＜0.05）〕。EM组回肠黏膜Chiu’s评分、血清炎症因子水平和小肠组织中ERS性凋亡相关蛋白p-PERK、CHOP、Caspase-12的蛋白表达水平及阳性面积等指标均较EL组进一步降低（均P＜0.05），小肠组织中Claudin-1蛋白表达水平及阳性面积等指标均较EL组进一步升高（均P＜0.05）；EH组回肠黏膜Chiu’s评分、血清炎症因子水平和小肠组织中ERS性凋亡相关蛋白p-PERK、CHOP、Caspase-12的蛋白表达水平及阳性面积等指标均较EM组进一步降低（均P＜0.05），小肠组织中Claudin-1蛋白表达水平及阳性面积等指标均较EM组进一步升高（均P＜0.05）。结论 EGCG可能通过抑制ERS性凋亡通路的活化对脓毒症大鼠肠道损伤起到一定的保护作用，且高剂量EGCG疗效更佳。

黄玮玮,马涛,李志华,王毅,高晓明,于湘友. 表没食子儿茶素没食子酸酯通过抑制内质网应激性凋亡减轻脓毒症肠道损伤的机制研究[J]. 中华急诊医学杂志, 2024,33(4): 529-535.
DOI号:

基金项目：国家自然科学基金（82160360）；新疆维吾尔自治区科技支疆项目（2021E02064）
伦理审批号：新疆医科大学伦理委员会（IACUC-20220728-09）

关键词： 脓毒症 肠道损伤 表没食子儿茶素没食子酸酯 内质网应激 凋亡