目的 探讨诱导性多能干细胞来源的外泌体（induced pluripotent stem cell-derivedexosome, iPSC-Exo）对脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）刺激的小胶质细胞释放炎症因子的作用。方法 将本实验室冻存的脓毒症患者尿液细胞来源iPSC 复苏并培养，低温超速离心法分离iPSCExo，透射电子显微镜、免疫印迹试验和超高灵敏流式检测技术（high sensitivity flow cytometry,HSFCM）验证提取物为外泌体。LPS（100 ng/mL）刺激人小胶质细胞系HMO6细胞建立炎症反应模型，根据外泌体浓度梯度分为4 组，即LPS+磷酸盐缓冲液（phosphate buffer solution,PBS）组、LPS+iPSC-Exo 105组、LPS+iPSC-Exo 106组、LPS+iPSC-Exo 107组，对照组将LPS等量替换为PBS。培养24 h 后检测细胞内丙二醛（propylene glycol, MDA）浓度，RT-qPCR检测细胞内巨噬细胞炎性蛋白（macrophage inflammatory protein 2, MIP2）、肿瘤坏死因子-α（tumornecrosis factor-α, TNF-α）、白介素（interleukin, IL）-1β和IL-6的mRNA表达水平，酶联免疫吸附法测定上清液中上述炎症因子蛋白浓度。相同外泌体浓度下，组间比较采用单因素方差分析及SNK-q检验。结果提取物经透射电子显微镜观察为球形膜结构，HSFCM示提取物平均直径为（74.66±15.60）nm，浓度约为2.98×1010/mL，免疫印迹试验示外泌体标志物CD63、Alix和TSG101高表达，不表达GM130。与对照组比较，LPS+PBS组细胞内MDA浓度、炎症因子（MIP2、TNF-α、IL-1β和IL-6）mRNA表达水平及蛋白浓度均明显升高（均P<0.01）。随iPSC-Exo浓度增加，细胞内MDA浓度逐渐降低（P<0.01），细胞内各炎症因子mRNA表达呈逐渐下降趋势（均P<0.05），炎症因子蛋白浓度的变化趋势与相应炎症因子mRNA基本一致。对照组炎症指标不随iPSC-Exo浓度增加而变化。结论脓毒症患者尿液细胞来源iPSC-Exo可下调LPS诱导的小胶质细胞氧化应激及炎症因子表达水平，并且抑制作用呈剂量效应性增强。

马礼秀,肖策,章智哲,詹以安. 诱导性多能干细胞来源的外泌体抑制小胶质细胞炎症反应[J]. 中华急诊医学杂志, ,: 52-58.
DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2023.01.009

基金项目：国家自然科学基金（ 82060345）；江西省自然科学基金（20192BAB205057）
伦理审批号：南昌大学第一附属医院医学研究伦理委员会[(2021) 医研伦审第8-013号]

关键词： 外泌体 诱导性多能干细胞 小胶质细胞 脓毒症脑损伤 炎症因子