我国西南地区是世界上生物种质资源最为丰富的区域之一，千姿百态丰富多彩野生蘑菇给人们带来无穷想象力，总有人进行品尝新奇蘑菇探究。本研究报告一起发生在云南元谋，因采集和食用一种能发出荧光蘑菇，致使12人中毒事件。本研究从采集、食用、中毒表现、救治等进行了调查，并经形态分类鉴定、分子鉴定确定蘑菇种属。

云南省元谋县毒蘑菇中毒12人，全部为男性，年龄23～52岁，平均年龄40.2岁，职业为工人。收集未吃完剩余的蘑菇样本。

通过对12名患者3 d内餐次调查，确定毒物暴露时间，对食物及食材分析，结合对食物加工方法、就餐者进食情况分析，确认此次事件性质；采集可疑食物样本(未食用剩余蘑菇)；通过问询了解患者临床表现，参与诊治临床医生确认重要环节和时间节点。应用重点个体调查、描述流行病学方法对事件进行阐述。

本次调查以患者现场采集的尚未食用的剩余疑似毒蘑菇作为样本，对其进行整理和记录，标本编号为150804-32。将标本在45 ℃条件下彻底干燥，进行形态学和分子生物学鉴定。

主要包含宏观形态和显微结构观察。宏观形态主要观察子实体颜色、大小、形状、质地、菌盖表面特征、菌褶特征(颜色、生长状态)、菌柄特征(颜色、长短、粗细、是否被绒毛、是否有菌幕)等。显微结构主要观察各部位菌丝的有无锁状联合；观察担子的形状、大小、担子梗的数目及长短、囊状体的有无、形状及大小等。

对事件标本进行DNA提取，ITS序列扩增，测序，后经过序列比对、校正，最后进行系统发育树的构建。采用最大简约法，使用PAUP*4.0b10软件^[2]。具体参数设置参考文献^[3]。

对上述调查结果进行描述性流行病学分析。

2.1 流行病学调查 2.1.1 基本情况

2015年8月1日中午12时10分左右，云南省元谋县某电厂12名工友一起进食附近采集的野生菌，其形态如蝴蝶翅，黑夜能发出荧光，总采集量约100～200 g，一次性炒食。餐后10 ～30 min后，12人均出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状，罹患率为100%。

患者主要表现为不同程度的恶心、呕吐，腹痛、腹泻，以及头晕、胸闷等症状。4例症状较轻者门诊给予处理后拒绝治疗，8例患者于当晚(2015年8月1日17:00左右)入院治疗。在入院生化检查中，5例出现γ-谷丙转氨酶(GGT)升高和谷草/谷丙转氨酶(AST/ALT)降低，3例患者总蛋白和球蛋白升高，白球比降低，提示多数患者肝功能可能受到损害。4例患者肌酸激酶(CK)或肌酸激酶同工酶(CK-MB)出现升高，其中一例病情较重的52岁患者CK 789 U/L (正常值：26～196)，CK- MB 38 U/L(正常值：0～25)，肌钙蛋白正常。其余患者其他血清生化检查指标均正常。医院对病情较严重的3例患者给以机械洗胃，药用炭胃管注入保留，保护胃黏膜，输液促进毒物排泄治疗，对5例肝功能指标异常患者给予保肝治疗，8例患者全部给予对症支持治疗。治疗2 d后8例患者生化指标恢复正常。3～4 d后相继出院。出院后电话随访无异常不适。

经过对标本宏观和微观结构的观察，鉴定为发光类脐菇(omphalotus olearius)，如图 1(由于该标本送至疾控时耽误时间较长，标本有些腐烂，原本为黄色，但照片中发黑。更多照片可参考http://www.rogersmushrooms.com。主要形态学特征描述如下：

图 1 干燥后发光类脐菇的子实体照片 Fig. 1 Basidioma of omphalotus olearius when dry

图选项

宏观结构：子实体小至中型。菌盖直径3～6 cm，漏斗形，黄色至亮黄色；菌褶向菌柄方向延生，较密，金黄色至橘黄色；菌柄长3～7 cm，直径0.3～0.8 cm，圆柱形，黄色至亮黄色，向基部逐渐变细。显微结构：孢子印白色，担孢子近球形，(5～7) μm ×( 4.5～6.5) μm。

采用分子生物学PCR技术，提取该蘑菇样品DNA，经ITS扩增测序后，进行DNA测序。应用ITS片段构建发光类脐菇(omphalotus olearius)的系统发育树：共24个单元，所有651个特征位点包括500个恒定特征，75个无简约信息可变特征，以及76个简约信息特征。简约法共得到1个MP树，系统发育树的TL为202，CI为0.842，RI为0.894，RC为0.754，HI为0.158。系统发育树拓扑结构图见图 2。

图 2 基于ITS序列构建的发光类脐菇的系统发育树(黑体突出显示的为事件标本序列) Fig. 2 Phylogenetic tree of omphalotus olearius based on ITS dataset(Sequence from poisoning case specimen was in bold)

图选项

系统发育结果表明检测样本150804-32与发光类脐菇聚类到同一分枝，获得较高支持率(图 2,MP=75%)。鉴定该标本为发光类脐菇。

本次事件中，根据患者提供的剩余蘑菇样本，通过对其的形态学特征分析和分子生物学鉴定，确定为发光类脐菇。发光类脐菇为伞菌目、白蘑科、类脐菇属^[4]。是一种菌盖为橙色，形态与鸡油菌相似的蘑菇，含有生物发光蛋白荧光素酶(luciferase)，能发出蓝绿色荧光，常成簇生长于阔叶林中的树木基部，腐枝落叶层、腐木上。我国发生发光类脐菇中毒尚属首次报道。发光类脐菇含有多种生物活性物质，如omphalotin A^[5]、ferrichrome A^[6]和一系列倍半萜化合物^[7]，其中illudins S和illudins M 是高细胞毒性和基因毒性的倍半萜化合物。在细胞中NADH和 NADPH能够参与毒素还原反应，与DNA、蛋白质等亲核试剂形成结构更为稳定的加合物^[8]。Illudins S和 Illudins M，通常被作为治疗白血病和淋巴瘤的抗癌药物进行研究^[9]。在本次中毒事件中，发光类脐菇引起了胃肠炎反应为主的临床症状，5例患者出现轻微肝功能损害，4例患者出现血清酶学指标增高，因此，该菌引起的中毒以胃肠道炎性病变、轻度脏器损害为主，少数患者伴有血清肌酸激酶等酶学改变。给予患者清除毒物、保肝等对症支持治疗措施，8例患者全部痊愈，病程3～4 d。但是，临床表现和救治资料缺乏完整性和系统性，尚需在今后的工作中进一步积累。

该事件提示毒蘑菇的中毒救治需要在实践中不断积累经验，尤其对于发光类脐菇这类首次发现的中毒事件，还需要进一步开展毒蘑菇相关天然代谢产物的生物活性研究，通过明确致病毒素及其作用机理，对临床救治起到支持作用。为了更加有效地监测、控制、预防毒蘑菇中毒，提出以下建议：(1)卫生机构应加强毒蘑菇中毒控制工作，注意收集毒蘑菇标本及中毒事件临床资料。(2)对医务人员进行野外蘑菇拍照及蘑菇采集规范化培训，重点地区建立蘑菇形态学鉴别、分子鉴定专业队伍，加强中毒诊断和救治知识的培训；对群众有针对性地开展当地常见毒蘑菇的科普教育。(3)加强毒蘑菇中毒毒素分析和中毒机制等相关的基础研究，为毒蘑菇中毒控制提供技术支持。(4)加强对野生菌交易市场管理和对集体用餐场所的监督，减少毒蘑菇中毒事件发生。